免疫荧光用什么封闭比较好

一、免疫荧光用什么封闭比较好

BSA可以用来封闭，网上查到的浓度0．5％到2％都有，1％比较常见。

孵育一抗之前要加，封闭孵育时间过后，加一抗之前不要洗掉，只移除多余液体即可．之后不需要再封闭，但是一抗和二抗都应该用含有BSA的缓冲液来稀释。有些人还加tween来减少非特异性结合。

封闭抗原也可以使用二抗抗体所属动物种类的血清．没有统一固定的浓度要看情况。

用试剂盒则有自带的封闭试剂，效果更稳定有保障。

免疫染色实验一个重要特点就是最佳条件都是试出来的，每换一个抗体条件都可能需要调整。所以最好的办法是用生产商测试过的实验方法。写个邮件问一下，就这么简单。

二、手术室封闭消毒用什么

手术室空气消毒

空气消毒灭菌是手术室控制感染的重要环节，人员流动、房门开关次数及手术时污物增加，都可能造成空气细菌总数急剧增加，因此手术室空气消毒是手术室工作中重要的一个环节。

1、紫外线灯照射

紫外线灯是国内外常用的一种无毒、经济、方便、有效的空气消毒方法。安装方式以无罩悬空吊式最佳,照射30分钟至1小时基本能使室内空气达Ⅲ类环境标准；2小时达Ⅱ类环境标准。强调最佳安装方式，合理安排消毒间隔时间，照射时保持室内清洁干燥，灯管无尘，温度20-25℃，湿度50%-60%，紫外线杀菌效果受室内温度、湿度、照射时间、距离、灯管质量、照射强度、灰尘及消毒对象等影响。照射距离要求灯管悬挂在距地面2.5米以下,桌面上方1米处.紫外线存在一定的缺陷性,对人体皮肤及眼睛均有伤害，可致皮肤烧伤、角膜发炎、皮肤癌等，紫外线产生的臭氧催人老化，其气味使人难以接受，吸入过多会使人中毒，臭氧进入血液与血红蛋白竞争氧气，故只能在无人的状态下进行空气消毒。尽管如此，只要合理操作紫外线照射仍是手术室空气消毒的有效方法。

2、 使用电子灭菌灯

是利用电解空气产生臭氧来达到杀菌的目的，它不仅起到与紫外线灯相同的空气消毒效果，且不受有效消毒范围的限制，没有消毒死角存在。但每周仍需用化学消毒剂熏蒸。

3 、使用化学药物熏蒸

手术室运用紫外线灯或电子灭菌灯照射，结合每周末使用规定浓度及用量的福尔马林氧化熏蒸或采用乳酸加热熏蒸，均为可靠的空气消毒手段。但这些化学制剂对工作人员的皮肤、神经系统、胃肠道及呼吸道存在一定不良影响，可导致机体免疫力下降。由于配料不准、用量过低、作用时间短暂、药液使用过久、忽略容器的防护与消毒等，非但起不了消毒的作用，反可造成二次环境污染。

4、 新一代动态臭氧消毒机

对空气和物体表面的微生物、细菌、病毒灭活率>99.9%。由于其采用弥漫性循环消毒，无论有无遮挡物均无消毒死角。消毒机在产生大量臭氧气体的同时，产生大量的空气负离子，从而达到除异味，净化空气的效果。尤其适用于手术进行中及连台手术。

虽然现在又了净化手术室，但是因为各种原因，医院手术部的消毒措施还是不会放松

三、请问可不可以解释下抗体封闭剂的原理

ELISA 的基本原理就是将抗原抗体固定到特定的载体上进行反应，并通过酶催化底物发生化学变化将抗原抗体反应通过颜色的形式显现出来。主要步骤分为如下5个部分：

(1)将抗原抗体反应固相化：即试验中的包被环节，使抗原或抗体吸附于固相载体表面。其机制可能是聚苯乙烯表面间的疏水基团可以无选择性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破坏蛋白分子结构，保持其生物学特性和免疫学活性；

(2)封闭：固相吸附蛋白是非特异性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力，为了保障抗原抗体反应的特异性，因此，包被剩余的固相表面应该用抗原抗体反应无关蛋白封闭。一般认为牛血清白蛋白是最为理想的封闭剂，也可用脱脂奶粉、明胶、牛血清替代。

(3)抗原抗体反应：抗原或抗体在适当的介质下可进行特异的抗原抗体反应。

(4)酶反应：酶可以通过共价键与抗原或抗体连接形成结合物，当抗原抗体反应的时候，被检测靶目标中也结合了酶分子。

(5)底物反应：结合在抗原抗体中的酶分子，可以促使底物发生颜色反应，检测人员可以通过颜色来判定是否有免疫反应的存在，并可通过颜色的深浅判断标本中相应抗原或抗体的含量(颜色反应与抗原抗体的含量成正比)，可以裸眼观察，也可借用酶标仪在适当的波长读取吸光度值。

四、封闭抗体阴性需要治疗吗？

您好，封闭抗体属于是人类白细胞抗原，这些抗原可直接作用于胚胎，或通过释放炎性介质间接损害胎儿或胎盘，而导致流产。因此，治疗是必要的！目前临床上主要采用配偶白细胞免疫疗法，增加反复自然流产患者体内封闭抗体水平，等抗体上升，再安排怀孕，使妊娠得以成功。具体遵照本地医院医嘱执行即可！